تشخیص عفونت ویروسی لوسمی گاو با استفاده از روش nested-pcr

ویروس لکوز گاو ( blv ) رترو ویروسی است که موجب لکوز یا لمفومای مزمن  گاو در بسیاری از کشورهای جهان می شود. الیزا اولین روش تشخیصی برای غربالگری حضور پادتن ها بر علیه ویروس لکوز گاوی است. تا کنون روشن نشده است که آیا این روش پادتن ها را در زمان آلودگی به ویروس لوسمی گاو شناسایی می کند یا خیر. واکنش زنجیره ای پلی مراز (pcr) برای توالی های اختصاصی dna پروویروس هدف، در سلول های تک هسته ای خون محیطی (pbml) استفاده شده است. به منظور یافتن روشی حساس و کارا برای تشخیص آلودگی به ویروس blv در نمونه های خون و بافت ها یا محتواهای مختلف، روش آشیانه ای واکنش زنجیره ای پلی مراز (nested-pcr) بر اساس شناسایی ژن blv-gag طراحی گردید. آزمون آشیانه ای pcr بر روی نمونه های اخذ شده از گاوهایی که به صورت طبیعی آلوده شده اند (281 نمونه)، نمونه های بافتی پارافینی(3 نمونه) و dnaی تخریب شده (10 نمونه عقده لمفاوی سونیکه) انجام شد. حساسیت و ویژگی آزمون  pcr به ترتیب 85/0 و 84/0محاسبه گردید. درجه توافق بین دو آزمون (کاپا) مقدار 693/0 محاسبه گردید که قابل توجه است. ارزش پیشگویی مثبت آزمون (دقت) 82/0 و ارزش پیشگویی منفی آن 86/0 بود . در نهایت صحت آزمون 85/0 محاسبه شد. این مطالعه نشان داد که روش واکنش زنجیره ای پلی مراز آشیانه ای در مقایسه با روش های pcr معمولی استفاده شده در آزمایش های متفاوت از حساسیت بیشتری برخوردار است.  این تکنیک برای غربالگری انبوه و همچنین تشخیص dna پروویروس در نمونه های بافتی خاص اعم از پارافینه یا نمونه های قدیمی مفید خواهد بود.